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浅谈原核表达的技巧

作者:孙军,
中图分类:TP3 > 计算技术、计算机技术
原核表达是表达外源基因常用的方法,具有操作简单、快捷,需时较短,表达产量高,适合工业化等优点.本文作者根据自己的实践经验,总结了原核表达的一些技巧.

福氏志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体构建及其鉴定Construction and expression of a prokaryotic expression vector encoding efflux pump regulated protein gene marA of Shigella flexneri

作者:魏小娟,张继瑜,王松泰,牛建荣,李剑勇,周旭正,吴培星,李金善,
万方期刊分类:S8 > 畜牧兽医
目的 构建志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体并对其表达的蛋白进行鉴定.方法 采用PCR从志贺菌基因组DNA中扩增得到志贺菌外输调节蛋白基因marA,并将其定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建原核表达重组质粒pET-30a-m……

人类8型疱疹病毒开放读码框73C基因原核

作者:何方平,王星,林仁勇,卢晓梅,冯晓辉,张亚楼,张跃新,何斌,温浩,
中图分类:R3 > 基础医学
目的 构建人类8型疱疹病毒(HHV-8)基因开放读码框(ORF)73C重组原核表达质粒并诱导表达,获得HHV-8潜伏态相关核抗原重组蛋白,并对其免疫活性进行初步鉴定.方法 软件设计引物,分别在引物两端添加特异的酶切位点,以pGEM-Teas……

人重组蛋白nm23-H1突变体原核表达纯化与鉴定Prokaryotic expression,purification and identification of human mutant nm23-H1 protein

作者:杨雪琴,周清华,王东,王阁,马力,朱大兴,
万方期刊分类:RA > 大学学报(医药卫生)
目的:构建nm23-H1的S120G,S120G-P96S及$44A突变体原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化.方法:通过PCR方法扩增突变型nm23-H1目的片段,利用基因重组技术构建pET28a-nm23-H1突变型原核表达载体,并进……

沙眼衣原体D型MOMP基因原核表达载体的构建及序列分析Construction of a prokaryotic expresssion vector carrying MOMP gene from chlamydia trachomatis serovar D and partial sequence determination

作者:张驰,岳道远,李辉军,张洪波,
中图分类:R394 > 医学遗传学
目的:构建沙眼衣原体D型MOMP基因的原核表达载体,为沙眼衣原体基因工程疫苗的研究提供材料.方法:PCR技术扩增D型沙眼衣原体标准株的MOMP基因片段,将其定向插入原核表达载体pRSET多克隆位点中,构建重组表达载体.并用酶切分析、PCR扩……

原核系统可溶性表达策略Strategy of Protein Soluble Expression in Escherichia coli

作者:刘爽,胡宝成,
中图分类:Q78 > 基因工程(遗传工程)
获得大量目的蛋白的最简单最经济的方法是利用原核表达系统表达外源基因.但由于原核系统的自身特点,使所表达的蛋白常常形成无活性的包涵体.多年来世界各国的研究者为解决这一问题尝试了多种方法.本文简单介绍原核表达系统的特点及提高蛋白可溶性表达的常用……

重组人IL-10基因的构建Construction of recombinant human IL- 10 gene

作者:杨绍娟,吴晓冬,齐曦明,薛立娟,王维忠,张桂珍,邢德利,
中图分类:R392.1 > 免疫生物学
目的构建人IL-10原核表达载体.方法用PCR方法从质料pEGM-T-hIL-10中钓出去除信号肽及非编码区的基因,克隆到原核表达载体中.结果构建成原核表达载体pET-hIL-10,经DNA测序获得了正确的hIL-10基因序列.结论成功构建……

人fg12凝血酶原酶FRED结构域的原核表达、纯化及其凝血活性的鉴定Prokaryotic Expression,Purification and Procoagulant Activity Analysis of Recombinant Fibrinogen-related Domain Protein of Human fgl2 Prothrombinase

作者:李学军,宋善俊,李永敢,阳文捷,许力,魏华萍,
万方期刊分类:RA > 大学学报(医药卫生)
目的 建立人fg12凝血酶原酶纤维蛋白原相关结构域(fibrinogen-related domain,FRED)的原核表达系统,并鉴定表达蛋白的凝血活性.方法 应用RT-PCR从外周血单个核细胞扩增fg12凝血酶原酶FRED基因,克隆到原……

TRAIL基因原核表达载体的构建及鉴定

作者:董亮亮,
中图分类:F73 > 世界各国国内贸易经济
目的构建TRAIL基因的原核表达载体,为进一步研究奠定基础.方法通过PCR法扩增TRAIL片段,并将其连接到原核表达载体pPRME-Tb中,通过酶切、测序鉴定载体构建的正确性.结果经酶切、测序鉴定证实pPRMETb-TRAIL构建完全正确.……

结核分支杆菌Mtb8.4真核、原核表达质粒的构建与表达Construction and Identification of Mycobacterium tuberculosis Mtb8.4 Eukaryotic Expression Plasmid and Prokaryotic Expression Plasmids

作者:杨宏倩,李博,蔡宏,朱玉贤,
中图分类:Q786 > 基因的表达
低分子质量蛋白抗原Mtb8.4是一种非常重要的结核分支杆菌抗原,为了研制结核病核酸疫苗和进行结核病的诊断,分别将其构建到原核和真核载体中进行表达.以结核分支杆菌标准菌株H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因Mtb8.4,扩增产物酶……
相关服务:到中国技术专家网提问 原核表达
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