[目的] 克隆在植物抗病虫过程中具有重要作用的核糖体失活蛋白新基因,为该类蛋白基因功能研究和有效利用创造条件.[方法] 通过分析多种不同来源的植物核糖体失活蛋白的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1和P2,对药用植物望江南基因组进行PCR扩增,获得一种新的RIP基因片段.通过RACE法,获得了其全长cDNA序列-CassiaI.[结果] CsssinI基因全长为882 bp,其推导的氨基酸序列与葫芦科两个代表核糖体失活蛋白β-luffin 和Trichosanthin(TCS)的相似性分别为58.2%和34.7%,与GenBank中其它核耱体失活蛋白的序列无显著相似性.多重序列比对发现:Cassin I有9个氨基酸残基与TCS的N-糖苷酶活性位点 的残基完全相同,另外两个残基发生了变化.所有的活性位点都在P1/P2扩增区段内.[结论] 首次在望江南中克隆和报道一种新的核糖体失活蛋白基因,为进一步研究该基因的功能.并应用于作物转基因抗病虫害育种研究奠定了基础.

关键词: 望江南, 核糖体失活蛋白, 基因克隆, 特征分析, | 全部关键词