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融合蛋白PTD-XIAP的原核表达、纯化及其血脑屏障穿透功能的初步鉴定

Expression and Purification of PTD-XIAP Fusion Protein and Verification of the Penetrability Across the Blood Brain Barrier

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<<中国临床神经科学>>2003年 第11卷 第04期
作者: 樊永峰, 吕传真, 赵延欣, 乔健, 任惠民,

期刊-核心期刊 ISSN : 1008-0678(2003)04-0397-03
目的:原核表达、纯化PTD-XIAP融合蛋白,鉴定其血脑屏障的通透功能.方法:反转录大鼠脑组织RNA,用PCR法扩增编码XIAP蛋白BIR1-2、BIR3-RING及BIR-2的cDNA片断,重组入pTransVector表达质粒并转化大肠埃希菌BL21;以IPTG诱导表达,用NTA-Ni层析柱分离纯化,Western blot鉴定.PTD-BIR3-RING经腹腔注入小鼠体内,用免疫荧光法检测脑组织中的分布.结果:PTD-BIR3-RING得到表达,相对分子质量约30×103,与6×His单克隆抗体有特异性反应.注入小鼠体内后,脑组织中广泛分布有阳性细胞.结论:重组PTD-BIR3-RING具有良好的血脑屏障穿透功能.
关键词: 蛋白质转导域, XIAP, 蛋白表达, | 全部关键词

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