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稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
Expression of hGM-CSF in Stably Transformed BmN Cells of Bombyx mori
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<<蚕业科学>>2009年 第35卷 第02期
作者: 李曦, 赵越, 周文林, 曹广力, 薛仁宇, 贡成良,
期刊-核心期刊 ISSN : 0257-4799(2009)02-0302-06
为了建立稳定转化家蚕细胞持续表达外源基因的技术体系,构建了基于piggyBac转座子的带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)和新霉素抗性基因(neo)表达元件的转基因载体pigA3GFP-IE-neo-FH-hGM-CSF-polyA-fib-L-intronl,以及带有hGM-CSF和吉欧霉素(zeocin)抗性基因的昆虫细胞转化载体pIZT-IE-hGM-CSF,分别转染家蚕卵巢BmN细胞,并以含相应抗生素G418或zeocin的培养液筛选,得到稳定的转化细胞系FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF.ELISA检测结果显示,hGM-CSF在FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF转化细胞系的表达水平分别为1.534 55 fg/个细胞和2.227 38 fg/个细胞.
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