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家蚕脂质运载蛋白基因BmLip32的特征与表达活性分析
家蚕脂质运载蛋白基因BmLip32的特征与表达活性分析
Molecular Characteristics and Expression Analysis of Lipocalin Gene BmLip32 in Bombyx mori
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<<蚕业科学>>2009年 第35卷 第02期
作者: 牛伟涛, 于威, 盛清, 沈红丹, 张耀洲, 李珊珊, 聂作明, 陈健, 吕正兵, 王丹, 吴燕, 吴怡, 高攀,
期刊-核心期刊 ISSN : 0257-4799(2009)02-0264-09
从已构建的家蚕蛹期cDNA文库中筛选得到一条新的cDNA片断,经生物信息学分析发现其编码框具有脂质运载蛋白(lipocalin)保守结构域,命名为BmLip32基因,GenBank登录号为FJ602775.构建融合表达质粒pET-28a-BmLip32后转化大肠杆菌BL21并诱导表达,将纯化的His-BmLip32融合蛋白免疫新西兰大白兔成功制备多克隆抗体,效价大于1:12 800.RT-PCR检测结果表明BmLip32在家蚕蛹期转录水平最高,在5龄幼虫头部中的转录水平明显高于其它组织.Western blotting分析结果显示BmLip32在5龄幼虫头部大量表达.免疫细胞化学实验显示BmLip32蛋白存在于家蚕Bm5细胞的细胞质中.推测BmLip32基因是家蚕神经系统发育相关的重要调控基因.
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