本发明公开了一种重组人胱硫醚β-合成酶(rhCBS)在制备用于治疗或预防高同型半胱氨酸血症及其相关的糖尿病和心血管疾病的药物中的应用及其制备方法。制备方法主要采用大肠杆菌原核表达系统，经过表达条件的优化，获得活性很高的rhCBS；rhCBS能够显著降低细胞培养液中HCY浓度，显著提高心肌细胞、内皮细胞在高HCY水平下的存活率；在高同型半胱氨酸血症整体动物模型中，与传统的治疗高同型半胱氨酸血症的叶酸、VitB₆、VitB₁₂比较，rhCBS能够显著降低高蛋氨酸喂养的大鼠血浆中的HCY水平，减轻心肌和血管的损伤，具有非常明显的治疗高同型半胱氨酸血症的作用。rhCBS可以应用于制备治疗或预防高同型半胱氨酸血症及其心血管疾病的药物，具有广阔的市场前景。