本发明属于植物病毒分子检测技术领域，具体涉及马铃薯病毒和类病毒分子检测。本发明的特征是，通过一次复合PCR，同时检测四种马铃薯病毒和一种马铃薯类病毒。本发明还公开了马铃薯病毒和类病毒的特异引物设计及其检测方法。可用于马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯S病毒(PVS)和马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTV)的特异检测，具有特异性强，检测效率高和成本低等优点。